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转生长激素基因山羊羊奶的影响

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《畜牧与兽医杂志》2014年第九期

1材料与方法

1.1样品处理乙醚麻醉后进行眼角采血,部分血液放入装有肝素的抗凝管进行血常规检测,另一部分放入灭菌的EP管中,37℃温箱30min,放入离心机3500r/min离心20min,取上清液放入-20℃冰箱中保存;采取心脏、肝脏、肾脏、睾丸、卵巢并称重,计算器官指数(器官重/体重×100%),将组织用波恩氏液固定保存。

1.2血液和血清生化指标测定大鼠血液和血清送往东南大学附属中大医院送检。

1.3数据统计与分析数据均用SPSS17.0软件统计,差异显著性检验用单因子方差分析(one-wayANOVA,LSD)。统计结果以平均值±标准误表示。

2结果

2.1羊奶乳蛋白分析通过SDS-PAGE蛋白电泳分析结果如图1所示,转gh基因山羊羊奶与普通山羊羊奶的乳蛋白成分基本相同。

2.2生长曲线和平均日增重灌胃转gh基因山羊羊奶、灌胃普通山羊羊奶和灌胃生理盐水的雄性和雌性大鼠的生长曲线基本一致,生长趋势无显著差异(图2),对大鼠的平均日增重也均无显著影响(表1)(P>0.05)。

2.3器官指数和组织学观察结果为了检测转gh基因山羊羊奶对重要组织器官的影响,连续15d灌胃大鼠后,发现雄性和雌性大鼠的心脏、肝脏、肾脏、睾丸、卵巢的器官比重均无显著影响(P>0.05)(表2)。HE染色后检测结果显示,短期15d饲喂转gh基因山羊羊奶不会形成重要组织形态学的病变。

2.4血常规和血清生化指标测定结果表3血常规结果显示,无论是雄性还是雌性大鼠,连续15d灌胃转gh基因山羊羊奶与灌胃普通山羊羊奶及灌胃生理盐水对大鼠的白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白等血常规指标无显著影响(P>0.05)。普通山羊羊奶组雌性大鼠的血小板计数显著高于转gh基因山羊羊奶组和生理盐水组(P<0.05);而生理盐水组雌性大鼠的淋巴细胞计数显著低于转gh基因山羊羊奶组和普通山羊羊奶组(P<0.05)。对大鼠的总蛋白、白蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶等血清生化指标无显著影响(P>0.05)。

2.5免疫指标测定结果表5显示无论是雄性还是雌性大鼠,连续15d灌胃转gh基因山羊羊奶与灌胃普通山羊羊奶及灌胃生理盐水对大鼠的IgG、IgE、IFN-γ和IL-2等免疫指标无显著影响(P>0.05)。

3讨论

近年来,随着生命科学技术的不断发展与进步,各种转基因产品层出不穷]。转基因产品与人类的健康息息相关,所以在其投入市场前进行相关安全性评价是至关重要的。虽然已有许多转基因产品安全评价的法律法规及管理政策出台[12],但都流于形式,目前尚且缺乏对转基因产品的有效评价体系。因此,需采取科学严谨求真务实的态度,加快安全评价体系的建立健全,以确保转基因产品的安全性。本研究经SDS-PAGE蛋白电泳分析,发现转gh基因山羊羊奶与普通羊奶相比乳蛋白成分没有变化。

参照转基因食品安全性评价程序和方法及经济合作与发展组织(OECD)对化学品测试的相关导则,本研究采用每100g体重灌胃1mL的剂量,另外为了减少初乳与常乳中乳成分差异带来的影响,本研究将不同泌乳阶段的羊奶等体积混合,每天1次用转gh基因山羊羊奶直接灌胃大鼠并设有普通山羊羊奶及生理盐水对照组,评价转gh基因山羊羊奶对饲喂短期15d的雌、雄大鼠生长及代谢机能的影响。检测指标集中在生长曲线、平均日增重、器官比重、组织形态学观察等表观指标及与糖、脂、蛋白三大物质代谢密切相关的生化指标。试验结果显示,灌胃转gh基因山羊羊奶的大鼠与普通山羊羊奶组及生理盐水的大鼠在生长曲线、平均日增重无显著差异,大鼠的重要脏器均无明显病变,说明转gh基因山羊羊奶并不影响大鼠的正常生长。血常规是进行临床检查的重要指标之一,本研究表明灌胃转gh基因山羊羊奶对大鼠的白细胞计数、红细胞计数、血红蛋白等血常规指标无显著影响,说明转gh基因山羊羊奶不影响血液系统性能。普通山羊羊奶组雌性大鼠虽然在血小板计数指标上显著低于另外两组,但其血小板分布宽度、血小板压积、红细胞计数、红细胞压积等指标与另外两组无显著差异。

同样的,理盐水组雌性大鼠虽然淋巴细胞计数显著高于另外两组,但其淋巴细胞比率与另外两组无显著差异,且差异值在正常生理值范围之内。肝脏、肾脏是重要的解毒、排毒器官。谷丙转氨酶、谷草转氨酶等是反应肝脏功能的重要生化指标,尿素氮等是反映肾脏功能的重要生化指标,灌胃转gh基因山羊羊奶与灌胃普通山羊羊奶及灌胃生理盐水的大鼠在这些生化指标均无显著差异,说明转gh基因山羊羊奶对大鼠的代谢机能无显著影响。IgG和IgE是体液免疫的主要效应分子,IFN-γ和IL-2是细胞免疫的主要效应分子,这些免疫指标没有显著差异,说明转gh基因山羊羊奶没有破坏免疫功能,在今后的研究中将着重观察中长期饲喂转gh基因山羊羊奶对大鼠的生长、代谢机能等是否会产生影响,为转基因羊奶的产业化利用提供实验基础。

作者:徐文雯胡唯伟胥婧祎杨帆陆辉俞慧清杨倩庾庆华单位:南京农业大学动物医学院上海转基因研究中心

畜牧与兽医杂志责任编辑:杨雪    阅读:人次
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