滑石粉炒肉豆蔻炮制工艺探讨范文

摘要:目的优选最佳滑石粉炒肉豆蔻炮制工艺，为滑石粉炮制药材的工艺筛选及质量评价提供研究思路及方法。方法采用L9(34)正交实验，以挥发油及去氢二异丁香酚为指标综合分析，选择滑石粉炒制时间、滑石粉粒度、滑石粉炒制温度、滑石粉用量四个因素进行考察，筛选滑石粉炒肉豆蔻炮制工艺。结果选择0.5倍于药物的200目滑石粉170℃，翻炒20min为滑石粉炒鱼鳔胶最佳工艺，验证试验表明最佳工艺切实可行，结果稳定。结论采用客观、可靠的评价指标，对传统滑石粉炒肉豆蔻“不断翻炒，直至有油渗出为度”的工艺进行了研究;为进一步制定滑石粉炒肉豆蔻饮片的质量标准提供了依据。

关键词:滑石粉炒;肉豆蔻;炮制工艺;正交试验

肉豆蔻属于肉豆蔻科的植物肉豆蔻属中肉豆蔻(Myris-ticafragrantsHoutt)的干燥成熟的种仁，又名豆蔻、肉果、玉果、麻失等。现代药理研究表明，肉豆蔻具有消炎、抗菌，镇静等作用，肉豆蔻的主要化学成分为挥发油和脂肪油，另外，去氢二异丁香酚是肉豆蔻的非挥发性成分，有较强的抑菌作用，属于肉豆蔻的活性成分［1］。肉豆蔻在临床上大多数炮制后入药，现代滑石粉炒肉豆蔻的炮制工艺通常为:将滑石粉加热炒至滑利状态，取肉豆蔻，投入锅中，不断翻炒，直至有油渗出为度，出锅，放凉，除去表面滑石粉，备用［2－4］。本研究以挥发油及去氢二异丁香酚为指标综合分析，采用正交试验设计法筛选滑石粉炒肉豆蔻炮制工艺。

1仪器与试药

KQ－500DB超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);高效液相色谱仪(日本岛津);肉豆蔻(购买于四川科伦天然药业有限公司，20130830，经成都中医药大学炮制教研室黄勤挽副教授鉴定合格)，氯化钠为分析纯，去氢二异丁香酚对照品(批号:MUST－13062804成都曼思特生物科技有限公司)

2方法与结果

2.1炮制品评价指标

2.1.1挥发油含量测定方法［3］:称取供试品20g，精密称定，置于烧瓶中，加200ml水与数粒玻璃珠，振摇混合后，将挥发油测定器与回流冷凝管连接好。从冷凝管上端加水，并使水充满挥发油测定器的刻度部分，至溢流入烧瓶时为止。将其置电热套中缓缓加热至沸腾，保持微沸状态约5h，直到测定器中的油量不再增加，停止加热，室温下放置片刻，缓慢开启测定器下端的活塞，将水缓缓放出，直至油层上端到达刻度0线上面5mm处停止。室温放置冷却1h以上，然后开启活塞使油层缓慢下降至其上端恰与刻度线平齐，准确读取挥发油量，同时计算供试品中挥发油的含量(%)。

2.1.2去氢二异丁香酚含量测定方法

2.1.2.1色谱条件:色谱柱:DikmaKromasilC18(250mm×4.6mm，5μm)色谱柱;检测波长:274nm;流动相:甲醇－水(75:25);柱温设定30℃;流速设定1.0ml/min;进样量20μl。理论塔板数以白术内酯é计算应不低于3000。

2.1.2.2对照品溶液的制备:称取去氢二异丁香酚对照品90.0mg，精密称定，置于25ml量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度(0.36mg/mL)，作为贮备液;精密量取贮备液2.5ml，置于25ml量瓶中，加甲醇定容，配制成36μg/mL的对照品溶液。

2.1.2.3供试品溶液的制备:称取本品粉末(过2号筛)约0.5g，精密称定，将粉末置具塞锥形瓶中，精密加入50ml甲醇，称定重量，超声处理(功率250w，频率40kHz)30min，放置室温冷却，再次称定重量，加入甲醇补足减失的重量，然后摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.1.2.4标准曲线的绘制:精密吸取对照品溶液，分别以2.5、5、7.5、10、12.5、15、17.5μL进样，按照上述色谱条件测定峰面积。以进样量作为横坐标，峰面积作为纵坐标，进行线性回归，线性回归方程:y=140000x－24126，R=0.9999，结果表明去氢二异丁香酚在0.090～0.63mg之间峰面积与进样量之间呈良好的线性关系。

2.1.2.5精密度实验:精密吸取对照品溶液10μL，按照上述色谱条件，连续进样5次，测定去氢二异丁香酚色谱峰峰面积，计算RSD为1.599%。结果表明，仪器精密度良好。

2.1.2.6重复性实验:精密称取同一炮制品各5份，分别按照供试品溶液制备方法操作，精密吸取各供试品溶液10μL，计算RSD为3.680%，结果表明，重复性良好。

2.1.2.7稳定性试验:精密吸取同一供试品溶液，按0、2、4、6、8h时间间隔分别进样10μL，测定去氢二异丁香酚峰面积，计算RSD为2.186%。结果表明，样品溶液在8h内保持稳定。

2.1.2.8加样回收率试验:取已知含量的肉豆蔻药材粉末约0.25g，共6份，精密称定，分别加入去氢二异丁香酚标准品溶液，按“

2.1.2.3”项下的方法制备供试品溶液，各精密吸取10μl，按上述色谱条件进行测定，计算加样回收率，计算平均加样回收率为102.343%，RSD为3.321%2.2炮制工艺研究［5－9］目前滑石粉炒肉豆蔻的炮制工艺没有具体可量化的操作工艺参数，给生产和质量控制带来不便，因此，本研究针对“将滑石粉加热炒至滑利状态，取肉豆蔻，投入锅中，不断翻炒，直至有油渗出为度，”，对滑石粉炒肉豆蔻的工艺进行系统研究，将从滑石粉用量、滑石粉粒径、炮制温度、炮制时间4个方面进行考察，以挥发油与去氢二异丁香酚含量为指标，优选滑石粉炒肉豆蔻工艺。

2.2.1滑石粉用量的考察［3］:按照2010版《中国药典》(一部)附录ⅡD炮制通则项下滑石粉炒的规定，每100kg净药材用滑石粉40～50kg，试验中为确保最佳炮制工艺，增大药材与辅料的比例范围，筛选最佳的辅料用量。称取肉豆蔻药材4份，按照每100g肉豆蔻加滑石粉50g，70g，100g，130g依次炮制，炮制温度为160°，炮制时间为20min。挥发油与指标性成分去氢二异丁香酚含量测定分别参照“

2.1.1挥发油含量测定方法”与“

2.1.2去氢二异丁香酚含量测定方法”。随着滑石粉用量的增加，有效成分去氢二异丁香酚含量先增高后降低，挥发油总量先减小后增大，滑石粉去油率并不是随着用量的增加而增强。从去氢二异丁香酚含量与炮制成本的角度考虑，初步认为药材与滑石粉用量以50～70g/100g肉豆蔻之间为宜。

2.2.2炮制时间的选择:称取肉豆蔻4份，置滑石粉中炮制10、15、20、25min(根据文献查阅所得)，炮制温度为160°，出锅，趁热筛去表面滑石粉，放凉。

2.2.3炮制温度的选择:称取4份肉豆蔻，分别在140℃，160℃，180℃，200℃，炮制15min。

2.2.4滑石粉粒度大小的考察:称取肉豆蔻4份，分别用200目、300目、400目、500目滑石粉于150～170℃中炒制。

2.2.5正交试验:根据前期的单因素试验结果，以去氢二异丁香酚的含量为主要指标，挥发油总量为参考指标。按L9(34)正交实验设计安排肉豆蔻炮制试验，置于设定不同温度的锅内，使用不同粒径与不同用量的炮制辅料滑石粉不停翻炒直至设定的时间，立即取出。

2.2.6数据分析:滑石粉炮制肉豆蔻时滑石粉用量、滑石粉粒径、炒制时间、炒制温度对其有效成分去氢二异丁香酚含量无显著性影响。中国药典2010版中炮制品肉豆蔻含去氢二异丁香酚(C20H22O4)不得少于0.080%，正交试验结果显示，去氢二异丁香酚含量符合药典规定。根据直观分析结果与炮制成本综合考虑得出较佳水平组合为A2B2C1D3，即炮制辅料用量为0.5倍药材量，于170℃，200目滑石粉炮制时间20min。挥发油含量方差分析结果显示，影响挥发油含量因素的主次顺序为C＞A＞D，即滑石粉用量与滑石粉粒径对挥发油含量具有显著性影响，炮制温度为影响挥发油含量的次要因素。

2.2.7验证试验:以最佳炮制工艺制备3批样品，验证试验评价工艺的可靠性。

3结论与讨论

3.1结论本研究发现:滑石粉用量与滑石粉粒径对挥发油含量有显著性影响，随着用量的增加挥发油含量先降低后增加，当滑石粉用量70g/100g左右时，炮制品挥发油量减少的最多;而随着粒径的减小炮制品挥发油的含量亦为先降低后增加。对于肉豆蔻有效成分去氢二异丁香酚，其化学性质稳定，炮制温度、炮制时间、滑石粉用量及粒径大小均未对其含量产生显著性影响。因此，根据实验结果并结合炮制成本综合考虑，最终选定肉豆蔻的炮制辅料———滑石粉的用量为0.5倍药材量，于170℃，200目滑石粉炮制时间20min。

3.2讨论［10］目前滑石粉炒肉豆蔻的炮制工艺没有具体可量化的操作工艺参数，给生产和质量控制带来不便，因此，本研究针对“将滑石粉加热炒至滑利状态，取肉豆蔻，投入锅中，不断翻炒，直至有油渗出为度，”，对滑石粉炒肉豆蔻的工艺进行系统研究，将从滑石粉用量、滑石粉粒径、炮制温度、炮制时间4个方面进行考察，以挥发油与去氢二异丁香酚含量为指标，优选滑石粉炒肉豆蔻工艺。本文围绕炮制辅料滑石粉对药物的影响进行系统研究，结果显示:粒度是滑石粉重要的质量标准，其大小对炮制品品质具有显著性影响，滑石粉炮制肉豆蔻时，可减少挥发油含量，避免滑肠，小粒径滑石粉去油能力较强，但粒径过小，粉体表面活性增大，吸附性增强，炮制时吸附在药材表面，降低滑石粉传热速率与均匀性，使成品挥发油量反而增加。另外，滑石粉用量对挥发油含量有显著性影响，随着用量的增加挥发油含量先降低后增加，当滑石粉用量70g/100g左右时炮制品挥发油量减少的最多。肉豆蔻有效成分去氢二异丁香酚化学性质稳定，炮制温度、炮制时间、滑石粉用量及粒径大小均未对其含量产生显著性影响。因此，滑石粉作为一种炮制辅料，应建立辅料滑石粉的质量标准:首先应从其粒度进行研究规定;辅料滑石粉用量的多少也是影响中药炮制品质量的重要因素，针对不同种类药材，不同炮制目的，加入的炮制辅料用量应不同，不应一概而论。对于辅料滑石粉标准的建立还应从其来源、滑石中杂质的含量(如毒性成分石棉等)多方面着手，建立完善的辅料标准。

参考文献

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［10］张振凌．谈中药炮制辅料应建立专用标准［Z］．中华中医药学会中药炮制分会2003学术研讨会论文集，2003:29－33.

作者：李楠1；谭裕君1；杨明2 单位：1.成都中医药大学药学院，2.江西中医药大学