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黄连不同炮制品体外抑菌实验范文

黄连不同炮制品体外抑菌实验

【摘要】[目的]研究黄连不同炮制品的体外抑菌效果。[方法]将黄连不同炮制品水煎液置于培养基中与细菌同时温育,观察药物对细菌生长繁殖的影响,以此判断药物抑菌作用的强弱。[结果]以药物最低抑菌浓度(MIC)显示黄连不同炮制品均有抑菌作用,但作用强弱不同。[结论]黄连不同炮制品与生黄连一样均有不同程度的抑菌作用,但作用菌群有变化。

【关键词】黄连;体外抑菌;实验研究

黄连为常用中药,临床运用广泛,其有效成分为小檗碱。据古书记载黄连能治“肠辟腹痛,妇人阴中肿痛”,“泻心火,去中焦湿热”,“治诸疮,赤眼暴发”等。近代研究证明黄连和小檗碱均有明显的体外抑菌作用,而且抑菌范围广[1]。然而黄连不同炮制品临床应用也较常见,故笔者对黄连生品和几种炮制品的水煎液的抑菌作用进行了体外实验观察,现将结果报道如下。

1实验材料

1.1药材原料黄连购自杭州华东医药药材公司,为毛茛科植物黄连CoptisChinensisFranch的干燥根茎,根据《中国药典》(2005版)鉴定为正品。其不同炮制品为:(1)生黄连:取原药,成簇者掰开,除去泥沙等杂质,抢水洗净略润,切薄片,干燥。(2)炒黄连:取原药,炒至表面棕黄色,微具焦斑时,取出,摊凉。(3)酒黄连:取黄连,与黄酒拌匀,稍闷,炒至表面色变深时,取去,摊凉。黄连与黄酒的比例为100∶12.5。(4)姜黄连:取黄连与姜汁拌匀炒至表面色变深时,取出,摊凉。黄连与姜汁的比例为100∶12.5。(5)萸黄连:取吴茱萸加适量水煎煮,煎液与净黄连拌匀,待液吸尽炒干,取出,摊凉。黄连与吴茱萸的比例为100∶10。

1.2实验菌种由杭州市桐庐第一人民医院检验科微生物实验室提供。

2实验方法

2.1水煎液的制备称取黄连生品及各炮制品饮片10g,分别加10倍量蒸馏水浸20min后,加热煮沸1h过滤,在药渣中再加5倍量蒸馏水煮沸半小时后过滤,将两次滤液合并,在沸水浴上浓缩成1g/ml浓度的水煎液备用。

2.2抑菌试验采用混合法进行,将各炮制品水煎液的原液,分别用无菌蒸馏水作等倍稀释(1/2~1/32),加入双倍营养琼脂混合,倾注成平板。分别接种一定菌龄(12~16h)及一定浓度(80万/ml)的实验菌液,置37℃温箱培养,经24h后观察各细菌在不同药物浓度中能否生长,不生长的药物最低浓度,即为该药物最低抑菌浓度(MIC)。

3实验结果

黄连不同炮制品的抑菌作用,以该药物的最低抑菌浓度来衡量其对常见细菌的体外抑菌效果,结果见表1。

表1黄连不同炮制品的体外抑菌效果(略)

实验结果表明,黄连不同炮制品的水煎液对上述各菌株均有不同程度的抑制作用。生品和各种炮制品对福氏痢疾杆菌、宋内氏痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌抑菌作用较强,对伤寒杆菌、副伤寒杆菌抑菌作用较弱,此结果和有关资料相符[2]。而酒黄连水煎液对金黄色葡萄球菌和白色葡萄球菌的抑制作用优于生品及其他炮制品。

4体会

黄连中主要有效成分为小檗碱(黄连素)。黄连碱,药根碱也是抗菌作用的重要成分[3],因协同作用,所以黄连的抑菌作用强。实验结果显示,不同炮制品和生品相比也都有一定程度的抑菌作用,这是因为具有抗菌作用的小檗碱在生品和各炮制品中含量变化不大,经数理统计无显著性差异[4]。实验中各炮制品对不同细菌的MIC值不同,说明黄连经不同炮制后其所含成分发生部分变化,药理作用和抑菌机制也发生相应变化。所以,黄连生品及各种炮制品临床应用时应根据病情正确使用。