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紫外分光光度法测范文

苯甲醇注射液为注射用盐酸大观酶素的溶剂,具有镇痛作用,可减少注射时的疼痛,为消毒防腐药,用于局部止痛及制剂的防腐。《中华人民共和国药典》2005版[1-2]规定用气相色谱法对苯甲醇注射液中苯甲醇进行含量测定,由于操作费时且成本较高,故不适用于半成品的质量控制及快速分析,本文采用紫外分光光度法测定其含量,以气相色谱法的结果作为参照,发现该方法准确度高,精密度、重复性好。

1仪器与试剂

1.1仪器:UV一1201紫外分光光度计(北京瑞利分析仪器公司),AL104电子天平(梅特勒—托利多仪器有限公司),GC—9A气相色谱仪(日本岛津)。

1.2试剂:苯甲醇对照品(中国药品生物制品检定所),苯甲醇注射液(2mL:40mg,濮阳市汇元药业有限公司生产,批号:061201,061202,061203),聚乙二醇-2000(上海化学试剂总厂)。

2实验方法与结果

2.1测定波长的选择

取苯甲醇标准品适量,精密称定,加蒸馏水

溶解稀释至刻度,再精密吸取稀释溶液10ml,置100ml容量瓶中用蒸馏水稀释至刻度,用UV一1201紫外分光光度计于200~400nm范围内扫描,测得最大吸收波长为257nm,故选择257nm作为测定波长。

2.2标准曲线的绘制

取苯甲醇标准品约0.4g,精密称定,置200ml容量瓶中,加蒸馏水稀释至刻度,再精密吸取稀释溶液5ml、7.5ml、10ml、12.5ml、15ml、17.5ml,分别置100ml容量瓶中用蒸馏水稀释至刻度,在257nm处测其吸光度,以浓度(C)为横坐标,吸光度(A)为纵坐标绘制标准曲线,

经线性回归,回归方程为A=1.7971C+0.0065(r=0.9999,n=6),苯甲醇浓度在0.100~0.400mg/mL范围与吸收度成良好线性关系。

2.3回收率试验

精密称取苯甲醇标准品适量,配置成不同浓度的注射液,在257nm处测其吸光度,代入回归方程,计算苯甲醇含量,测定结果见表1

表1回收率测定结果(n=6)

编号投入量测得量回收率平均回收率RSD

(mg/ml)(mg/ml)(%)(%)(%)

10.12510.1262100.87

20.21370.2142100.23

30.29460.2971100.84

40.34130.3458101.31100.790.39

50.38750.3892100.44

60.42620.4307101.05

2.4精密度实验

称取苯甲醇标准品适量,精密称定,稀释浓度约为0.20mg/mL的溶液,在257nm下测其吸光度,A值分别为0.3590、0.3650、0.3610、0.3680、0.3730,RSD为0.02%(n=5),表明该法对供试品溶液具有较好的精密度。

2.5稳定性实验

取0.2mg/mL苯甲醇标准品溶液,在25℃,分别于0,1,2,4,6,12,24小时内,257nm处检测吸收度,结果表明其吸收度无明显变化。

2.6样品的含量测定

2.6.1供试品溶液的配制精密量取本品5ml,精密加内标溶液10ml,置50ml容量瓶中加蒸馏水至刻度,摇匀,备用。

2.6.2对照品溶液的配制取苯甲醇对照品约0.1g,精密称定,置50ml容量瓶中加甲醇10ml使溶解,精密加内标溶液10ml,加水稀释至刻度摇匀,备用。

2.6.3测定方法取苯甲醇注射液5批,依法稀释使其浓度为0.2mg/mL,用蒸馏水作空白实验,在257nm处测定吸光度,计算A值,代入回归方程,计算相当标示量,并与气相色谱法测定结果相比较,结果见表2

表2紫外分光光度法与气相色谱法

样品含量测定结果(标示量%)

批次气相色谱法紫外分光光度法误差%平均误差%

06120196.4097.200.80

06120297.9098.680.780.65

06120397.5098.100.60

06120496.7097.150.45

06120598.1098.710.61

经比较可知,3批供试品的平均误差为0.65%,误差较小。

3讨论

采用紫外分光光度法测定苯甲醇注射液含量具有操作简单、费时少、准确度高等优点,适合进行过程控制的半成品的测定。