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检验医学中胶体金免疫结合试验的应用

2019/09/08 阅读:

[摘要]目的探究胶体金免疫结合试验在检验医学领域的价值与应用。方法从2018年1月—2019年1月该院收治的相关疾病患者进行随机抽取,共600例患者进行研究,使用胶体金免疫结合分为GICA(金免疫层析试验)和GIFA(金免疫渗滤试验),通过不同的疾病类型选择不同类型试验,在几种不同类型的疾病(细菌性疾病,真菌性疾病,病毒疾病等)中使用胶体金免疫结合试验,分析其在不同类型疾病中的检验结果以及检测准确性。结果胶体金免疫检测的两种病毒性疾病(柯萨奇病毒和流行性出血抗体)灵敏度分别为96.37%和98.15%,检测符合率为95.0%和96.5%,检测准确率高。该试验检测寄生虫疾病灵敏度略高于渗透法,灵敏度分别为98.00%和100.0%,但两种检测方法间差异无统计学意义(P>0.05);胶体金免疫结合试验在该次检测的疾病中灵敏度均高于95%(除梅毒,灵敏度78%),特异性多为60%~70%,灵敏度检测效果好。结论胶体金免疫结合试验在检验医学中对各类疾病的检验有明显的效果,可以给部分疾病的诊断提供重要信息,提供更加有效的治疗方案。但该试验特异性较低,有待改进。

[关键词]胶体金免疫结合试验;检验医学;应用

胶体金免疫结合试验是固相标记免疫测定技术,用于检测疾病,其检验的基础是酶免疫结合试验,这种技术的优势较为明显,比如操作简便、得出结果的时间较短等优点,在检测过程中不需任何的仪器设备进行辅助,短短几分钟就可以测定出结果,在临床医学中,这是应用相对广泛的一种疾病检测技术[1]。为了探究胶体金免疫结合试验在检验医学中的应用价值,将该项技术在不同的疾病检验中进行应用,研究其在检验医学领域的可行性[2]。从2018年1月—2019年1月该院收治的共600例患者进行随机抽取患者进行研究,现报道如下。

1对象与方法

1.1研究对象

选取病毒性、细菌性及寄生虫疾病案例进行检测,选取结果从中随机抽取病例进行检测,共600例患者。1.2方法胶体金免疫结合试验技术主要根据以下流程进行疾病检测的检测:把微孔滤膜作为检测的载体,并且把已知的抗体或者抗原进行包被,然后把需要检测的标本按顺序依次加入微孔滤膜中,由于滤膜的毛细管作用,滤膜上所包被的抗体或者抗原就会待测标本中的抗体或抗原进行充分的结合,最后,经过胶体金结合物以达到检测标本的目的[3-5]。通过不同的检验装置可以把胶体金免疫结合分为GICA(金免疫层析试验)和GIFA(金免疫渗滤试验)。

1.3评判标准

观察各类疾病检测的灵敏度以及特异性,通过数据体现使用检测方法的好坏。

2结果

2.1胶体金免疫结合试验对病毒性疾病的检验结果

2.1.1柯萨奇病毒的检测柯萨奇病毒可以诱发许多种类的疾病,为了能够对快速的检测柯萨奇病毒因而研制了IgM抗体胶体金免疫层析诊断试纸条,该次试验检测了84份血清样本,把逆转录PCR技术作为评判的标准,胶体金免疫结合试验的特异性为67.16%,灵敏度为96.37%。见表1。

2.1.2流行性出血热抗体的检测在流行性出血热抗体的胶体金免疫结合试验检测中,选取94份流行性出血热患者的血清作为样本,使用胶体金免疫试剂盒进行检测,结果阳性94份,检测灵敏度为98.15%,见表1;接着对健康人的血清54份,54份血清检测结果全部为阴性;胶体金免疫试剂盒检测乙肝、钩体病以及其他出血性疾病共230份血清,检测结果全部为阴性[6-8]。对肾综合症出血热患者的50份血清进行检测,该疾病由汉坦病毒引起,使用胶体金免疫渗透法对抗汉坦病毒IgM抗体,18份病程在3d之内,有16份表现为阳性,剩下的32份病程在4d以及4d以上全部表现为阳性[9]。

2.1.3艾滋病抗体的检测该次试验对18家申报注册艾滋病抗体快速检测试剂进行检测,对强阳性的400份样本检测灵敏度都是100%;对340份健康血样的检测中,特异性在96.56%~100.00%,在300份高危人群的血样检测中,所有试剂的灵敏度在73.53%~95.06%该范围内,2家特异性为较低,分别为56.73%和58.65%,其余的检测基本都在94.89%以上。

2.2胶体金免疫结合试验对寄生虫病的检验结果

关于寄生虫疾病主要检测的是血吸虫,用快速免疫金渗滤法进行血吸虫抗体的检测,检测总灵敏度为97.35%,慢性血吸虫患者灵敏度为97.73%,急性灵敏度为99.80%,晚期患者的灵敏度为91.50%,血吸虫非流行区的病人痊愈特异性为95.90%,流行区内的病人痊愈特异性相对较低,为82.8%[10]。快速免疫金渗滤法检测的灵敏度、特异性和诊断效率与胶体金SEA-dipstick方法十分相似。胶体金SEA-dipstick方法对于慢性血吸虫患者灵敏度为98.0%,急性患者灵敏度100.0%,见表2。

2.3胶体金免疫结合试验对细菌性疾病的检验结果

2.3.1金黄色葡萄球菌的检测在金黄色葡萄球菌的检测中主要采用快速免疫金渗滤法,检测的最低下限为3.2×106~6.0×106cfu/mL[11]。该次检验检测的20株不产毒素的金黄色葡萄球菌和15株大肠埃希菌,两种菌体均有一株产生了交叉反应,10株沙门菌和志贺菌,6株腐生菌和链球菌都没有发生交叉反应,见表3。

2.3.2沙门菌的检测沙门菌的检测主要采用抗原吸收法,在封闭环境下,让抗沙门菌与其他的肠道杆菌发生交叉反应,并把标记胶体金溶胶制作成探针状,接着使用多膜复合的方法把其制作为免疫层析条,制作出来的免疫层析条的灵敏度为11.8×106cfu/mL,检测108-1011cfu/mL的菌悬液发现并没有出现钩状效应[12-13],见表3。

2.3.3鼠疫耶尔森菌的检测鼠疫耶尔森菌的检测使用快速免疫金渗滤法,鼠疫耶尔森菌具有良好的特性,和小肠结肠耶氏菌在密闭环境下不会发生交叉反应,检测出的最低检出限为2.3×105cfu/mL,使用免疫层析法检测出的鼠疫耶尔森菌灵敏度为1.2×105cfu/mL。见表3。

2.4胶体金免疫结合试验对其他微生物疾病的检验结果

在针对梅毒的检测试验中,我国的胶体金试剂盒检测的梅毒临床病例灵敏度为73.4%,高于日本富士公司的TPPA试剂和美国的梅毒螺旋体特异性抗体胶体金法。该次检验中,使用胶体金免疫结合试验对红斑狼疮患者、孕妇以及其他正常体检人群的血清进行检测,其中,红斑狼疮患者血清有58例、孕妇血清有30名、正常体检人群血清有20名,检测结果均为阴性。

3结论

胶体金免疫结合试验在检验医学的应用比较广泛,对于病毒性疾病、细菌性疾病以及寄生虫类疾病都有较好的效果,柯萨奇病毒、艾滋病抗体以及流行性出血热抗体的检测中灵敏度都较高,两者的检测灵敏度分别为96.37%和98.15%,但特异性百分比只有67.16%,在病毒性疾病的检测中特异性需要进一步的改善。在寄生虫类疾病中,该实验对于急性血吸虫患者的灵敏度检测相对较高,慢性患者其次,晚期患者最低,但检测灵敏度均高于95.00%,有较好的检测结果;在梅毒的检测中,灵敏度仅有73.40%,低于其他疾病灵敏度,但我国的胶体金试剂盒与日本富士公司的TPPA试剂和美国的梅毒螺旋体特异性抗体胶体金法相比,灵敏度都较高。研究表明,胶体金免疫检测血清心脏型脂肪酸结合蛋白的符合率为95.09%,与该实验中检测结果相符,除此,该试验还可用于结核抗体、破伤风抗体、风疹抗体、结核抗体、结核抗体、流感病毒、衣原体以及登革热抗体等的检测,胶体金胶体金免疫结合试验同时还具备操作简便、得到结果快速、不需与其它贵重仪器设备配合使用等优点,因此,胶体金免疫结合试验在检验医学上的应用可以加以推广,这对于患者在疾病的预防、检测以及医生进行治疗方面都有积极的作用。综上所述,胶体金免疫结合试验是一种新兴的具有较好检测效果的免疫学检验方法,比传统检验方法更加利于操作、速度更快。但是该方法还具一定的局限性,灵敏度与检出率也需要继续完善,更好地确保胶体金免疫结合试验在医学检验中的应用效果。

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[12]蔡瑞英,王小慧,马聪,等.极端环境条件对胶体金免疫层析产品的影响评估[J].军事医学,2017,41(9):758-761.

[13]刘键,王艳丽,赵勇,等.免疫磁珠酶催化新技术在H7N9流感病毒高灵敏检测中的应用[J].转化医学电子杂志,2017,4(4):52-54.

作者:张志宏 赵梅 谢斌 单位:山东省滕州市中心人民医院检验科

检验医学中胶体金免疫结合试验的应用

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