儿童急性淋巴细胞白血病染色体分析范文

摘要：

目的对儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）中的染色体核型及融合基因进行分析。方法应用骨髓染色体标本及FISH方法对38例儿童ALL患者做染色体核型分析及融合基因检测。结果38例检测患儿中发现染色体异常核型7例；融合基因检测阳性者12例，其中7例是TEL/AML1阳性。结论细胞遗传学联合融合基因检测有助于儿童ALL的诊断及预后判断分析。

关键词：

急性淋巴细胞白血病；染色体；融合基因

急性淋巴细胞白血病（ALL）是儿童时期常见的恶性肿瘤之一。染色体异常与白血病的发生及预后密切相关。WHO分型以来，对染色体的改变和融合基因的表达越发重视。本文对我院2011年9月至2014年12月收治的38例ALL儿童的染色体核型及融合基因检测结果总结分析，以期为儿童急性淋巴细白血病的诊断、治疗及预后判定提供帮助。

1资料与方法

1.1研究对象河北省儿童医院2011年9月至2014年12月确诊为ALL的患者38例，所有病例均符合张之南主编的血液病诊断及疗效标准[1]，其中女性8例，男性30例，年龄分布为1岁8个月～11岁。

1.2标本采集及实验方法

1.2.1染色体标本来自骨髓，肝素抗凝，选择髂后上棘为穿刺点，严格消毒，抽取骨髓0.2～0.4ml，应用24～48h短期培养法制备染色体，收集有丝分裂中期细胞，G显带，直接镜下分析核型，每例至少分析50个分裂相，核型异常参照《人类细胞遗传学国际命名体制》[2]进行描述。

1.2.2应用FISH方法检测融合基因BCR/ABL、E2A/PBX1，用配有DAPI/FITC/TRITC三色激发块的OlympusBX51显微镜检测杂交信号，并采用显微照相机进行照相。

2结果

2.1染色体及融合基因检测结果38例病例中，染色体核型检查，失败2例，正常核型29例，异常核型7例；融合基因检测显示阳性12例。

2.2异常的核型及其融合基因结果如下表1：在上表中，融合基因阳性合并染色体核型异常2例，其余的10例融合基因阳性的结果分别为：TEL/AML1阳性7例，相应染色体结果中有2例无分裂相，5例染色体结果正常；E2A/PBX1阳性1例，其染色体结果均正常；BCR/ABL（210）阳性2例，其染色体结果均正常。

3讨论

随着近年来治疗水平的不断提高，白血病患者总体无病存活率（DFS）可达80%左右，但仍有部分儿童ALL临床疗效很差。目前，对于儿童ALL患者，染色体异常与诊断和预后的联系已经得到了比较广泛的认可，染色体核型检查结合融合基因的检测有助于临床判断ALL的危险度分级，也是合理用药的基础。本组试验中，染色体核型异常联合融合基因阳性共计检出15例，占患者总数的40%，染色体核型异常者中数量异常者占42%，融合基因检测中BCR/ABL阳性占患者总数7.8%，E2A/PBX1阳性占患者总数的5%，这与其他文献中大致相当或略高[3-5]。肿瘤和白血病研究组B（CALGB）8811研究及9111研究，通过分析大量ALL患者的不良预后因素与生存关系认为，不良试验室特征如BCR-ABL阳性或费城染色体（Ph）阳性等是重要的预后不利因素。这是由于9q34断裂，其脱落的部分易位到22q11，由此形成的异常22号染色体。9号染色体长臂远端的ABL原癌基因易位至22号染色体的BCR基因断裂点，在分子水平上形成BCR-ABL融合基因，它包括多个功能区域，具有复杂的生物学活性，例如：持续增强的酪氨酸激酶活性，影响细胞增殖、分化和凋亡等的信号转导；抑制细胞凋亡；改变细胞的黏附特性，导致过多未成熟的细胞释放到外周血；削弱细胞对生长因子的依赖性，引起细胞的过度增殖等[6]。在本试验中发现3例BCR/ABL阳性阳性，给予常规剂量化疗，预后不佳，缓解期较短，这与文献报道相符。

另外本试验发现2例E2A/PBX1阳性的患儿，经采用研究提示的强烈化疗方案[7]，预后得以改善，表明染色体分析在儿童ALL的诊疗中有着重要的指导意义。研究表明，除BCR/ABL融合基因外，TEL-AML1融合基因也是ALL儿童常见的预后判断指标。在染色体结构畸变中，t（12；21）（p13；q22）是儿童ALL最常见的染色体易位，t（12；21）所形成的融合基因TEL/AML1，在其中，TEL失去Ets结构域，AML1几乎保持完整，TEL-AML1融合基因造成TEL功能的丧失并抑制AML1的转录活性，从而影响造血细胞归巢和抑制造血干/祖细胞分化成熟。TEL/AML1多见于儿童前B-ALL，而T-ALL较B-ALL更易复发，TEL/AML1一般可作为ALL一个独立的预后好的因素，有此融合基因出现可明显提高ALL的缓解率[8]。本文的7例TEL/AML1阳性患儿均为前B-ALL，在治疗过程中发现，在开始化疗的第29天骨髓涂片检测结果均有所缓解，且早期复发率低，亦与文献报道相符。另外，对比本试验中染色体核型以及融合基因的检测结果，融合基因检测对儿童ALL患者染色体畸变更为敏感，但其无法检测出染色体数量异常及缺失等情况，因此染色体核型联合融合基因检测可以更有效的检出儿童ALL患者的染色体畸变，从而有助于患者的临床治疗和预后判断。

作者：王青霞 刘征燕 马琳 安会波 单位：河北省儿童医院病理科