探索滤纸在病理白片保存中的应用范文

在日常病理工作中，通常需要切取大量白片用于免疫组化等相关研究，但传统玻璃白片易碎、运输不方便，导致保存不理想，而且白片制作时间过久会导致部分抗原发生衰弱降低，影响实验结果，本文经实验发现滤纸可以作为储存白片的媒介，后期能方便快速的转移到黏附载玻片上，同时能很好的保存白片抗原，现介绍如下。

1材料与方法

1．1标本随机选取定位于细胞核、细胞膜、细胞质的免疫指标各三项进行监测，以Ki67、p16、MUM1、HER2、CD10、CD99、CK7、NapsinA、Arg1作为监测指标，根据监测指标选取相应的阳性标本各10例，其中MUM1、CD99和Arg1选择标本为弱阳性标本。

1．2材料及仪器黏附载玻片、滤纸、玻片储存盒、密封袋、Leica切片机、Roche全自动免疫组化染色机。

1．3试剂Ki67一抗购自DAKO公司，HER2、p16一抗购自罗氏公司，CD10、CK7、NapsinA、CD99、MUM1一抗购自福州迈新公司，Arg1一抗购自北京中杉金桥公司。

1．4方法（1）将Ki67、p16、MUM1、HER2、CD10、CD99、CK7、NapsinA、Arg1阳性标本连续切片2张，其中1张直接行免疫组化染色作为对照组，余1张用滤纸制作白片后放入密封袋中室温存放，储存1个月后行免疫组化染色，并与对照组比较。（2）滤纸白片制作及后期转移方法：将滤纸裁剪成玻片大小，切取白片后放入漂片仪中，用滤纸捞取白片沥干水分后放在干净的纱布上，待其充分晾干后，放入密封袋中挤掉空气储存。使用时，将滤纸白片取出，将黏附白片的一面朝上放入漂片仪中，放置约15s后，用镊子将滤纸斜放入水中，此时白片即可自然脱落，然后用黏附载玻片正常捞片即可。

2结果

染色后，随机选取两名诊断医师，观察对照组与滤纸组相对应的5个不同区域并进行染色结果对比，结果显示：滤纸储存白片的染色效果与对照组比较基本一致，阳性标本抗原性保存较好，弱阳性标本抗原性也保存良好。

3讨论

病理组织蜡块属于病历资料，一般由医院保管［1］，如若需要进一步研究一般由病理科提供白片，但白片在室温中存放过久，组织切片上的抗原会发生衰弱［2］，对结果造成较大影响，其原因可能与白片接触空气氧化等因素有关，虽然有的病理科将白片浸入融化的石蜡以保存抗原，但此法导致切片黏附的石蜡太多太厚，脱蜡易不足，且若石蜡质量不好、杂质太多易附着在组织上影响染色结果。另外根据陈杰伟等［3］报道，随着时间的推移，玻片黏附力呈下降趋势，极易出现脱片问题，影响染色结果，因此有效保护白片的抗原性及完整性是必要的。本文采用的是普通滤纸，质地菲薄，经水浸透后晾干不变形，可以很好的作为白片载体，由于其材质本身的亲水性，对石蜡制作的白片黏附性很低，方便后期的转移。将滤纸白片储存在密封袋中，可以更好的隔绝空气等不良因素，以便更好的保存组织抗原。滤纸仅仅是作为白片的中间媒介，使用时将白片重新转移到黏附载玻片上，方便各实验室选择适合自己的玻片，降低脱片几率。与传统玻璃白片相比，滤纸白片具有质量轻和体积小的优点，这意味着在同样大小的储存盒中，可以储存更多的白片，还可以避免玻璃白片因材质导致的运输易碎等问题，具有很大的优势。病理技术标准化日益成为国际和国内病理学的发展趋势，随着医学的发展，对免疫组化染色结果的可靠性要求也越来越高［4］。免疫组化在判断肿瘤组织起源、分类及良、恶性肿瘤的鉴别方面发挥着非常重要的作用［5］，是病理诊断中最常见的“武器”，因此保证病理白片的抗原质量对保证染色结果的准确性至关重要。本文使用滤纸作为白片储存的媒介，方法简单快捷，可用密封袋真空保存，抗原性保存好，对弱阳性抗原也有较好的保存效果，成本低廉，非常适合白片的暂时保存。

参考文献：

［1］陈辉，余波，章如松，等．病理会诊常见问题与对策［J］．诊断病理学杂志，2017，24（1）：79－80．

［2］BancroftJD，GambleM．组织学技术的理论与实践［M］．6版．周小鸽，刘勇，译．北京：北京大学医学出版社，2010：414．

［3］陈杰伟，刘君，卢佳斌，等．Leica、Dako和Roche的免疫组化自动化染色平台应用体会［J］．临床与实验病理学杂志，2017，33（4）：465－467．

［4］刘勇，杨海玉．国际特设专家委员会建议：诊断免疫组化阳性对照标准化［J］．临床与实验病理学杂志，2016，32（1）：1－3．

［5］王璐．不同方式进行的EDTA抗原热修复对免疫组化结果的影响［J］．诊断病理学杂志，2017，24（2）：143－144

作者：付海洋 李宏 李玉军 付广明 时维平 张翔雁 史海磊 戚慧阳