ABO血型表现性检测的应用范文

《刑事技术杂志》2014年第二期

1方法

取0．3cm2血斑或唾液斑，剪碎后置于试管中；在试管中加200μL样品稀释液，溶解5min，震荡混匀；检验前将试剂条从袋子中取出，如有冷藏保存的，必须平衡到室温，平置于台面上；吸取100μL待检样本，加入到试剂条的加样孔中，10min后观察结果。

2结果

72份志愿者的血斑和唾液斑经检验，均得出了与原先一致的血型结果。2份陈旧的已知血型的案件检材（18年前血斑）也得到了一致的血型检验结果（见图1、图2）。

3讨论

该胶体金试剂条是利用免疫组化的方法检测ABO血型表现型，该方法出结果快而且直观。待检样品经样品稀释液浸泡溶解后，将稀释液滴加到试剂条的加样孔中，样品中的A型、B型抗原与试剂条上胶体金标记的抗A、抗B抗体发生特异性结合，形成携带胶体金的抗原抗体复合物，在层析作用下，该复合物沿硝酸纤维素膜试纸向前移动，当移动至底物区时，抗原抗体复合物被硝酸纤维素膜上预埋的特异性底物所捕获、富积，由于胶体金的特殊作用，在试剂条上直接显示红色阳性标记带，如果是AB型血，出现A标记带和B标记带；A型血只有A标记带；B型血只有B标记带；O型血则没有标记带。

目前，随着DNA技术的发展，ABO血型表现型的检验在很多法医物证实验室都已经被淘汰，这是因为案件现场中提取到的生物斑迹比较陈旧，而且还可能有污染，这些都会使血型物质降解而无法得到准确的ABO血型表现型。过去使用的血凝集试验，针对的是5％红细胞悬液或全血，若红细胞悬液浓度过低，那么微弱、细小的凝集就看不到，从而造成假阴性结果。另外，针对分泌型的吸收试验、解离试验、混合凝集试验等方法，通过抗血清效价的变化来判断，所以抗血清的效价必须与检材中所含凝集原的量相适应，否则就会造成错误判型，而且操作复杂、技术条件要求高，所以目前该方法也已经被淘汰。

本研究中的胶体金试剂条以及自制的样品稀释液可以快速、准确获得血斑、唾液斑的ABO血型表现型，检验时间短，不影响后续的DNA检验；而且能够适用于陈旧的生物学斑迹。因此可以适用于法庭科学中的日常检案。

作者：郝金萍金鑫周毅尹文宁杨智单位：公安部物证鉴定中心海南省公安厅刑警总队北京丰台区公安司法鉴定中心天津市公安局