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发用类化妆品微生物检验

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摘要:

目的:分析发用化妆品的微生物检验方式的适用性。方法:根据微生物限度的检查法对7件不同品牌发用化妆品实施致病菌的检测与菌落计数,同时行方法学的验证。结果:倾注法下7种发用化妆品中通过1:10供试液,应用孟加拉红的培养基与含5%聚山梨酯80、0.5%卵磷脂孟加拉红培养基的方法检验得出,黑曲霉以及白色念珠菌回收率为0;在1∶100供试液下,应用薄膜过滤方法,所有发用化妆品大肠埃希菌回收率都超过了70%,但是金黄色葡萄球菌以及枯草芽孢杆菌回收率均在70%以下,无法彻底消除抑菌的作用。结论:在发用化妆品进行微生物检验时,应尽量降低铜绿假单胞菌的试验结果中假阴性可能性,而粪大肠菌群与金黄色葡萄球菌检测方法还需要改进。

关键词:

发用类化妆品;微生物检验;适用性

化妆品主要包含蒸发用品、洗发用品与护发用品等,其包含成分多种多样,极易引起变质。一些产家为了防止化妆品变质,常常会添加一些防腐剂,这就加大了微生物的检验过程假阴性可能性。本文主要分析发用化妆品的微生物检验方式的适用性,具体如下:

1材料以及方法

1.1实验的对象:A-去屑洗的发露、B-去屑的洗发露、C-丝质顺滑类去屑的洗发露、D-清屑舒润与调理的洗发露、E-新活炫亮类去屑柔亮的洗发乳、F-去油净屑的洗发露、G-芦荟止痒滋润的洗发露。

1.2仪器、菌株和试剂。菌株:大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉。试剂:孟加拉的红培养基、聚山梨酯80以及卵磷脂吐温-80的营养琼脂培养基;大豆的卵磷脂与硝酸纤维的薄膜。仪器:生物的安全柜、洁净的工作台、生化的培养箱、保温的震荡仪、微波炉与灭菌锅。

1.3实验的方法

1.3.1倾注方法。菌液组:取1毫升已配置菌液,注入到平皿之中,再加入适量培养基,对菌液中菌落数进行测定。样品的对照组:取不同的稀释级别下(1∶10,1∶100,1∶1000)1毫升供试液注进平皿中,然后孟加拉红的培养基、卵磷脂或者是吐温80-的营养琼脂培养基,对样品本底菌落数进行测定。观察组:取不同的稀释级别下1毫升供试液以及1毫升已配置菌液,分别放入同一个平皿中,再添加培养基,对菌落数进行测定。

1.3.2薄膜的过滤法。菌液组:取1毫升已配置菌液,注入到平皿中,添加培养基,对菌液中菌落数进行测定。实验组:取1毫升供试液,加到100毫升0.9%无菌的NaCl溶液中进行过滤,把0.9%无菌的NaCl溶液当做冲洗液,进行三次冲洗,每一次100毫升,最后一次要在冲洗液中添加1毫升试验的菌菌液,待过滤后将滤膜取出,把滤膜的冲洗面向上贴于卵磷脂吐温-80的营养琼脂板上,对样品本底菌落数进行测定。样品的对照组:取1毫升供试液,和实验组方法一致,不添加试验菌,通过薄膜过滤方法来测定本底的菌落数。

2结果

2.1倾注法下各培养基对于真菌的回收率影响:7中发用化妆品中通过1∶10供试液,考察了应用孟加拉红的培养基与含5%聚山梨酯80、0.5%卵磷脂孟加拉红培养基方法的适用性,得出黑曲霉以及白色念珠菌回收率为0;把1∶100供试液作为最低的稀释级,应用孟加拉红的培养基,仅有一份检品黑曲霉的回收率达到77%,其他结果不理想。

2.2考察薄膜过滤方法对于细菌计数方法的适用性:在1∶1000供试液下,应用薄膜过滤方法,七件发用化妆品3株试验的菌株回收率均超过70%,和倾注法结果比较,没有明显差异;在1∶100供试液下,应用薄膜过滤方法,所有发用化妆品大肠埃希菌回收率都超过了70%,但是金黄色葡萄球菌以及枯草芽孢杆菌回收率均在70%以下,无法彻底消除抑菌的作用。

3讨论

从结果总可以发现,发用化妆品对于微生物抑菌作用比较明显,使用薄膜过滤方法,七种发用化妆品试验细菌菌株回收率到超过了70%,但由于操作复杂性,不建议使用。而在酵母菌与霉菌检测过程中,把1∶10供试液以及1∶100供试液作为最低的稀释级时,全部化妆品中黑曲霉与白色念珠菌回收率都是0,但是在1∶100供试液下,通过添加5%聚山梨酯80、0.5%卵磷脂孟加拉红培养基,发现除C-丝质顺滑去屑洗发露中黑曲霉的回收率达到52%外,其他化妆品试验菌株回收率到超过了相关标准的要求,而且5%聚山梨酯80、0.5%大豆卵磷脂对于试验菌株生长没有影响,和朱世真[2]报道一致。

综上所述,在发用化妆品的微生物检验过程中,应尽量降低铜绿假单胞菌的试验结果中假阴性可能性,而粪大肠菌群与金黄色葡萄球菌检测方法还需要改进。

参考文献

[1]刘广桢,徐晓洁,王德利.分析我国现行化妆品微生物检验方法存在的问题和改进建议[J].食品与药品,2013,14(03):24-27.

[2]朱世真,王立芳,王尊文.大肠菌群测试片在化妆品微生物检测中的应用[J].中国药师,2014,15(09):79-83

作者:孙胜平 王群林 单位:湖北省汉川市疾病预防控制中心

发用类化妆品微生物检验责任编辑:杨雪    阅读:人次