美章网 资料文库 还阳参化学成分探究范文

还阳参化学成分探究范文

时间:2022-12-07 09:29:44

还阳参化学成分探究

《中国中药杂志》2015年第二十期

还阳参为菊科植物还阳参Crepiscrocea(Lam.)Babc.的干燥全草,味苦,性微寒,具有益气、止咳平喘、清热降火之功效,主要用于治疗慢性支气管炎、肺结核等疾病[1]。课题组前期对还阳参这一地方药材进行资源调查、化学及药理活性等多方面的研究,明确了还阳参含有酚酸,甾体,多糖等多种化学成分,分离并鉴定了数种化合物[2]。在前期研究中发现还阳参乙酸乙酯部位具有止咳平喘活性,本实验主要针对该部位化学成分进行研究。通过采用硅胶、MCI和SephadexLH-20柱色谱及制备液相等方法从乙酸乙酯部位中分离并鉴定了12个化合物,分别为还阳参酯素Ⅰ(1),8β-(2-羟基-2-甲基-3-氧代丁酮酰氧基)糖美菊素(2),tectoroside(3),木犀草素-7-O-葡萄糖苷(4),大波斯菊苷(5),七叶内酯(6),原儿茶醛(7),反式-4-羟基肉桂酸(8),咖啡酸(9),2-羟基-3-(4-羟基苯基)丙酸甲酯(10),2-羟基-3(4-羟基苯基)丙酸乙酯(11)和顺式-3,4-二羟基-β-紫罗兰酮(12)。其中化合物1为新化合物,除化合物4,9外,其余化合物均为首次从该植物中分离得到。

1材料

BrukerDRX600MHz,BrukerDRX500MHz型核磁共振谱仪;APIQSTAR飞行时间质谱仪和VG-Auto-Spec-3000质谱仪BrukerApexIVFTMS;分析型HPLC为Agilent1100型(ZORBAXExtend-C18柱,4.6mm×150mm,5μm);制备型HPLC为Agilent1100(ZORBAXSB-C18柱,21.2mm×150mm和9.4mm×150mm,5μm);MPLC为瑞士步琪实验室技术服务有限公司BüchiSepacoreSystem;UV2450紫外-可见分光光度计(日本岛津公司);傅里叶变换红外光谱仪(美国ThermoFisher公司)。乙腈(色谱纯),TFA(分析纯)均为国药集团化学试剂有限公司产品。正相柱色谱硅胶(200~300目)由青岛海洋化工厂生产;反相柱色谱硅胶(ChromatorexC-18,40~75μm)由日本富士Silysia化工有限公司生产;SephadexLH-20由瑞典AmershamBiosciences公司生产;D101大孔树脂(批号120106)为天津市海光化工有限公司提供。还阳参C.crocea(Lam.)Babc.于2013年6月采自山西省雁北地区山阴县一带,放置阴凉处自然晾干,凭证标本(2013001),由山西省食品药品检验所高天爱主任药师鉴定,存放于山西省中医药研究院。

2提取与分离

还阳参药材约4kg,粉碎,用70%乙醇回流提取3次,每次1h,滤液合并浓缩,浸膏,加水混悬,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇多次萃取,萃取液减压浓缩,得石油醚层、乙酸乙酯层、正丁醇层及水层4个部位。取乙酸乙酯萃取物200g,加水超声溶解后,滤过,滤液通过D101大孔吸附树脂进行柱色谱,依次用水,10%乙醇,50%乙醇,95%乙醇溶液洗脱,收集各部分洗脱液,依次命名为EA1~4,分别减压回收溶剂,冷冻干燥,取EA3部位(39g)经硅胶柱分离(氯仿-甲醇100∶1~5∶1洗脱),分为6个部分Fr.1~6。Fr.2经硅胶柱(氯仿-甲醇50∶1洗脱)分为3个部分Fr.2.1~2.3,Fr.2.1进一步经Sepha-dexLH-20柱(氯仿-甲醇1∶1洗脱)分离得到化合物11(1.065g)。Fr.2.2经SephadexLH-20柱(氯仿-甲醇1∶1洗脱)分离得到化合物12(675mg)。Fr.2.3经硅胶柱分离(氯仿-甲醇100∶1~25∶1)及重结晶分别得到化合物1(39mg)和6(376mg);母液进一步经中压制备液相(MPLC,10%~30%甲醇洗脱)分离得到2个部分Fr.A,B。Fr.A经硅胶柱分离(氯仿-甲醇70∶1)及重结晶得到化合物7(115mg);Fr.B经SephadexLH-20柱分离(氯仿-甲醇1∶1洗脱)及重结晶得到化合物8(21mg)。Fr.3重结晶得到化合物9(1.176g)。Fr.4经MPLC(10%甲醇~甲醇洗脱)分离得到6个部分Fr.4.1~4.6,Fr.4.1经SephadexLH-20柱(甲醇洗脱)分离得到化合物10(52mg);Fr.4.2经SephadexLH-20柱(甲醇洗脱)、硅胶柱色谱(氯仿-甲醇20∶1~5∶1)分离得到2个部分Fr.C,D。Fr.C经SephadexLH-20柱(氯仿-甲醇1∶1洗脱)分离得到化合物2(100mg)。Fr.5进一步经硅胶柱色谱(氯仿-甲醇20∶1~5∶1洗脱)、SephadexLH-20柱(氯仿-甲醇1∶1洗脱)分离得到化合物3(54mg)。Fr.6经MPLC(10%~30%甲醇洗脱)分离得到化合物4(34mg)和5(2mg)。以上化合物经HPLC检测纯度均>95%。

3结构鉴定

化合物1无色结晶(CHCl3),HR-ESI-MSm/z449.1564[M+Na]+(计算值为449.1576),分子式为C24H26O7,不饱和度为12。UV(MeOH)λmax:221,278nm。IR(KBr)νmax:3467,3277,2951,1736,1723,1664,1254,1167,965,840cm-1。13C-NMR(DMSO-d6,150MHz)及1H-NMR(DMSO-d6,600MHz)谱显示化合物有1个甲基,4个亚甲基,6个次甲基,4个季碳,1个内酯环,2个双键。其中δC193.4(C-3),δC169.0(C-12)为2个羰基信号,δC144.2(C-10)和δC135.3(C-11)为2个双键季碳信号,δC121.8(C-13),δC115.1(C-14)为2个双键亚甲基碳信号。以上2个双键季碳信号,2个双键亚甲基碳信号和2个羰基信号为典型的愈创木烷型倍半萜的10(14),11(13),3和12位的环外双键特征[3]。1H-NMR谱中的δ4.41表明存在愈创木烷内酯环[4],结合其他碳氢信号,进一步证实化合物1为愈创木烷内酯类化合物[4]。化合物波谱数据与文献[5]中报道的化合物8-epigrosheimin数据及其相似,所不同的是化合物在C-8位连接的是酯基而不是羟基。HMBC谱中,H-8(δH5.53)与C-1'(δC172.9)有远程相关,证实C-8位连有酯键;羟基-OH质子信号(δH5.46)与C-1'(δC172.9),C-2'(δC71.5)和C-3'(δC39.2)有远程相关,证实羟基连在C-2'位。1H-NMR谱中,δH9.17(1H,s)提示为酚羟基-OH质子信号,δH6.96(2H,d,J=8.4Hz),δH6.61(2H,d,J=8.4Hz)提示为4个苯环氢质子信号,HMBC谱中,H-3'(δH2.63,2.77,dd)与C-1'(δC172.9),C-2'(δC71.5),C-1″(δC127.6),C-2″/C-6″(δC130.2)有远程相关,证实对羟苯基连在C-3'位。与相同位置构型一样的同类型化合物8β-(2-羟基)-2-甲基-3-氧代丁酮酰氧基-糖美菊素进行数据比对,确定化合物1位,5位,7位,8位质子和15位甲基均在一侧,为α构型[5]。结合NOE差谱:照射H-6,发现H-4有增益,表明H-6与H-4在同一侧均为β构型。至此,确定化合物1的相对构型,各基团的连接顺序见图1。根据SciFinder检索,该化合物未见报道,为新化合物,命名为还阳参酯素Ⅰ。其核磁数据归属见表1。

作者:李媛媛 彭照琪 贺石麟 倪艳 郝旭亮 单位:山西省中医药研究院

被举报文档标题:还阳参化学成分探究

被举报文档地址:

https://www.meizhang.comhttps://www.meizhang.com/yixuezazhi/zgzyzz/683354.html
我确定以上信息无误

举报类型:

非法(文档涉及政治、宗教、色情或其他违反国家法律法规的内容)

侵权

其他

验证码:

点击换图

举报理由:
   (必填)