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痰标本涂阳培阴结果影响

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《中国卫生检验杂志》2015年第二十四期

摘要:

目的探究影响痰标本涂阳培阴结果的因素。方法对1191份涂阳痰标本进行培养,从痰检阳性级别、患者就诊服药情况、标本保存时间进行统计分析。结果1191份涂阳痰标本的涂阳培阴率为20.07%,镜检报告级别≤8条、1+、2+、3+、4+痰标本的涂阳培阴率分别为37.50%、26.06%、22.06%、14.81%、8.08%,镜检级别越低涂阳培阴率越高,4+痰标本涂阳培阴率与≤8条、1+、2+、3+相比,差异有统计学意义(P<0.05)。痰标本保存时间≤3d、3d~7d、>7d的涂阳培阴率分别为14.75%、39.93%、45.95%,≤3d与3d~7d及>7d的痰标本的涂阳培阴率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论痰培养标本的选择、患者就诊治疗史、标本保存时间都直接影响到痰培养结果。

关键词:

结核病;痰标本;涂阳培阴;影响因素

结核病是由结核分枝杆菌引起的传染性疾病,控制传染源是预防肺结核病的重要途径,传染源主要是排菌的肺结核病患者,尤其是痰涂片和培养阳性者[1]。结核分枝杆菌痰检查对于发现传染源、确定诊断和化疗方案、考核疗效、评价防治效果具有重要意义[2],是实施全面监督化疗策略(DOTS)的重要要素之一,对结核病防控工作起着重要的作用。其中痰培养检测具有灵敏度高的特点[3],极大地增加患者发现率,分离菌株可进行后续的药敏检测、菌种鉴定和分子流行病学分析等。探讨影响痰培养结果的因素,保证痰培养质量就显得尤为重要[4]。本文主要从痰标本镜检报告阳性级别、患者就诊治疗史、标本保存时间方面进行比对分析,为提高结核病实验室工作质量提供数据参考。

1资料与方法

1.1资料信息来源于结核病信息管理系统(专报网)、肺结核患者登记本、肺结核患者随访登记本、结核病实验室痰检登记本、结核病实验室痰培养登记本等。标本来自全市9所耐药监测哨点及淄博市第一医院结核病实验室2014年1月-12月收集的1191份涂阳痰标本,保存于4℃冰箱。萋-尼染色试剂(批号:BA415031)、酸性改良罗氏培养基由山东省结核病防治中心统一制备。

1.2方法

1.2.1痰涂片镜检方法实验室采用萋-尼染色法,镜检结果参照《中国结核病防治规划•痰涂片镜检标准化操作及质量保证手册》进行。

1.2.2痰培养方法视痰标本性状做标本前处理,加1倍~2倍体积的4%NaOH消化液于痰瓶中,拧紧螺旋盖,涡旋振荡器上振荡,使痰液充分匀化,室温放置15min。用无菌吸管取去污染处理后的标本0.1ml,均匀接种在酸性改良罗氏培养基斜面上,每份标本接种2支酸性罗氏培养基。接种后斜面向上,于37℃环境中平放,24h后检查培养基有无污染,如无污染,拧紧瓶盖,直立放置,37℃继续培养。

1.2.3结果报告方法接种后第3d、第7d各观察一次菌落生长情况。发现菌落生长者,经抗酸染色涂片镜检证实后,可报告快速生长分枝杆菌阳性。如未发现快速生长分枝杆菌菌落生长,此后每周观察一次,记录菌落生长及污染情况。阳性生长物经抗酸染色涂片镜检证实后,可报告分枝杆菌生长。培养满8周后未见菌落生长者方可报告培养阴性。观察发现非抗酸杆菌生长时报告污染。

1.3统计学处理将数据录入MicrosoftOffice2003建立数据库,采用SPSS17.0软件进行统计学处理分析,组间比较采用χ2检验,以P<0.05为差异具有统计学意义。

2结果

2.1痰标本选择与涂阳培阴结果对1191份涂阳痰标本按照镜检阳性级别进行分类统计,发现≤8条、1+、2+、3+、4+的涂阳培阴率分别为37.50%、26.06%、22.06%、14.81%、8.08%,总涂阳培阴率为20.07%。镜检级别越低涂阳培阴率越高(表1)。同时选择4+痰标本的涂阳培阴率作为基准,其他镜检级别痰标本的涂阳培阴率与其比对,≤8条、1+、2+、3+涂阳培阴率差异均有统计学意义(χ2值分别为28.073、26.027、17.502、4.757,P<0.05)。

2.2患者就诊治疗史对涂阳培阴率的影响从结核病信息管理系统(专报网)、肺结核患者登记本、肺结核患者随访登记本等获取初诊患者与复治患者的信息,进行汇总分析显示,1191份标本中初诊患者与复治患者的涂阳培阴率分别为16.07%和30.53%,复治患者涂阳培阴率高于初诊患者涂阳培阴率,差异具有统计学意义(χ2=35.094,P=0.000)。

2.3痰标本保存时间对涂阳培阴率的影响≤3d、3d~7d、>7d的痰标本对应的涂阳培阴率分别为14.75%、39.93%、45.95%。3d~7d、>7d的痰标本的涂阳培阴率高于≤3d的痰标本,差异有统计意义(P<0.05)(表3)。

3讨论

涂阳培阴率是考核痰标本培养质量的重要指标,影响痰标本培养结果的因素较多,通过对1191份标本进行分析发现,在选择培养对象方面,应尽量选取镜检报告级别高的痰标本作为培养对象,越是阳性级别高的痰标本说明结核分枝杆菌检出越多,也反映了痰标本留取质量符合要求,是合格的痰标本,在培养过程中会出现较高的阳性率,充分表明了痰标本的质量对于培养具有重要影响[5]。在实际工作中做好正确引导患者留取肺部咳出的合格痰标本;提高实验室人员涂片与镜检能力,避免定性错误与误差出现,准确的读取镜检结果;按照3涂2培的要求,在选择痰标本进行培养时必须考虑阳性级别高的纳入培养对象,提高检出率。

本研究发现复治患者标本的涂阳培阴率显著高于初治患者,具有统计学意义,可能与患者服用抗结核药物有关,复治患者经过一段时间的抗结核药物治疗后,药效发挥作用杀死体内结核杆菌,患者病情有所好转,排菌减少及菌株活力低所致,也反映出其治疗效果较好[6]。而初诊患者没有服用抗结核药物治疗史,活菌比例较高,因此标本的涂阳培阴率显著高于复治患者。痰标本留取后保存时间较长,使得标本中的活菌数目以及结核杆菌的活力下降,进而使痰培养的涂阳培阴率降低,该结果与Paramasivan等报道的结果类似。综合考虑痰培养标本的选择、患者就诊治疗史、标本保存时间都直接影响到痰培养结果。建议结核病实验室在开展痰培养时应注重选择合格痰标本,在留取痰标本后的3d内尽早培养,对镜检报告级别低及复治患者的痰标本需要改进培养方法,确保培养质量。

参考文献

[1]张敦熔.现代结核病学[M].北京:人民军医出版社,2000:699-710.

[2]中华人民共和国卫生部疾病预防控制局,中华人民共和国卫生部医政司,中国疾控预防控制中心.中国结核病防治规划实施工作指南[M].北京:中国协和医科大学,2009:12-13.

[3]刘剑君,姜世闻,成诗明.中国结核病控制现状分析及对策[J].中国防痨杂志,2003,25(3):129-131.

[4]高风华,冯谦谨,江丽凤,等.中国大陆2002-2010年法定传染病疫情分析[J].现代预防医学,2013,4(4):756-759.

[5]黄石凤.2007-2008年宜章县919例活动性肺结核病人痰检检测结果分析[J].中国卫生检验杂志,2009,19(12):2914-2915.

[6]全国第五次结核病流行病学抽样调查技术指导组/办公室.2010年全国第五次结核病流行病学抽样调查报告[J].中国防痨杂志,2012,34(8):485-507.

作者:李源 高风华 单位:淄博市疾病预防控制中心

中国卫生检验杂志责任编辑:杨雪    阅读:人次