血清在结直肠癌患者中的临床价值范文

《结直肠肛门外科》2017年第1期

摘要：目的探讨血清肿瘤坏死因子－α（TNF－α）的表达在结直肠癌患者诊断中的应用价值。方法选取2015年2月至2016年11月于广州市中医医院住院治疗的结直肠疾病患者共130例，分为经手术病理组织明确诊断为结直肠癌患者90例（结直肠癌组），包括肠癌未转移患者和肠癌转移患者，经病理组织活检为结直肠良性疾病患者40例（结直肠良性疾病组），同一时间段来院体检健康人员40例（健康对照组），检测所有受试人员血清TNF－α及肿瘤标志物癌胚抗原（CEA）、糖类抗原724（CA724）水平。各组数据不呈正态分布，采用非参数统计方法分析比较。结果结直肠癌组患者血清TNF－α水平在临床TNM分期Ⅱ（中位数9．47pg／mL）、Ⅲ期（9．95pg／mL）、Ⅳ期（9．67pg／mL）明显高于TNMⅠ期（6．59pg／mL）；在肠癌转移组（9．95pg／mL）高于肠癌未转移组（8．03pg／mL），差异有统计学意义（P＜0．05）；TNF－α在不同年龄、性别受试者上的表达没有明显差异（P＞0．05）。各检测指标ROC曲线下的面积：TNF－α为0．868，CEA为0．912，CA724为0．523，3项联合检测为0．940。结论TNF－α在结直肠癌发生、发展过程中表达增加，其血清水平检测有一定临床应用价值，TNF－α在不同年龄、性别受试者上表达没有明显差异，具有广泛适用性。血清TNF－α、CEA、CA724的联合检测，在结直肠癌患者中水平明显升高，3项联合检测可起到优势互补，增加大肠癌诊断的敏感度，作为大肠癌的早期诊断、疗效评价和预后监测有意义的参考指标。

关键词：结直肠癌；肿瘤坏死因子－α；转移

结直肠癌是发生于结直肠部位的常见消化道恶性肿瘤，好发部位为直肠及直肠与乙状结肠交界处，近年来发病率逐年升高，5年生存率较低，肿瘤侵袭和转移是导致结肠癌患者预后差及死亡的重要因素。近年来研究表明细胞因子失衡与肿瘤的侵袭和转移密切相关，慢性炎症可能是导致肿瘤侵袭和转移的重要原因之一［1－2］。肿瘤坏死因子α（TNF－α）是主要由单核－巨噬细胞系统分泌的一种重要的细胞因子，有研究发现其与肿瘤细胞的浸润和转移密切相关，促进肿瘤的进展［3－4］。本文通过对比不同临床分期、肠癌是否转移患者的血清TNF－α水平，探讨其在结直肠癌患者早期诊断中的意义。

1资料与方法

1．1一般资料

选取2015年2月至2016年11月于广州市中医医院住院治疗的结直肠疾病患者共130例，男性68例，女性62例，年龄41～89岁，平均年龄67．3岁，其中90例结直肠癌患者（结直肠癌组），男性52例，女性38例，年龄42～89岁，平均年龄67．3岁；结肠癌患者53例，直肠癌患者33例，结直肠癌患者4例；肠癌未转移患者47例，肠癌转移患者43例；临床TNM分期Ⅰ期16例、Ⅱ期31例、Ⅲ期32例、Ⅳ期11例。40例结直肠良性疾病患者（结直肠良性疾病组）包括结肠息肉、慢性结肠炎、溃疡性结肠炎等良性病变，结直肠癌和结直肠良性病变患者均经病理组织活检或手术病理组织明确诊断。选取同一时间段来院体检健康人员40例（健康对照组），男性22例，女性18例，年龄41～88岁，平均年龄65．0岁。1．2仪器与试剂血清TNF－α测定仪器使用西门子DPC1000全自动化学发光免疫分析仪，血清癌胚抗原（CEA）、糖链蛋白724（CA724）测定仪器使用罗氏Rochecobas－e601全自动电化学发光分析仪，试剂和校准品采用其公司原装配套试剂，离心机为北京白洋BY－4000A。

1．3方法

2组患者于治疗前空腹用一次性真空采血管采集静脉血，室温静置30min，3500r／min离心10min，分离得到血清，置于－20℃冰箱保存待用。血清TNF－α、CEA、CA72检测采用化学发光法，参考值：TNF－α0～8．1pg／mL，CEA0～10ng／mL，CA7240～8．2U／mL。以上项目均按试剂盒说明检测，严格按照标准操作规程操作，并在室内质控在控范围下检测。1．4统计学处理统计学处理使用SPSS17．0统计软件进行数据处理。各组数据不呈正态分布，采用非参数统计方法，用中位数及四分位间距［IQR，（P25～P75）］表示，两数据间比较采用非参数完全随机两独立样本的轶和检验（Mann－Whitney法），多数据间比较采用非参数完全随机多组独立样本的轶和检验（Krusdal－Wallis法）。诊断效能评价指标采用敏感性、特异性、准确度、阳性预测值、阴性预测值表示，采用SPSS17．0软件绘制受试者工作特征（ROC）曲线并进行Logistic回归分析，评价各标志物指标单独和联合检测ROC的诊断价值，以P＜0．05为差异有统计学意义。

2结果

2．1TNF－α作为结直肠癌的血清标志物的适用性研究

TNF－α在不同年龄、性别的受试者表达上的差异不具有统计学意义（P＞0．05），TNF－α作为结直肠癌血清标志物具有较广泛适用性。

2．2TNF－α在结直肠癌患者TNM分期的不同表达水平研究

TNF－α在肿瘤发展过程中起重要作用，详细结果显示，TNF－α在结直肠癌患者TNMⅠ期TNF－α表达水平最低，与Ⅱ～Ⅳ期比较差异均有统计学意义（P＜0．05）。2．3TNF－α在结直肠癌患者肿瘤是否转移的表达水平研究TNF－α在结直肠癌患者肿瘤转移患者中的表达水平［9．95（8．47～12．93）pg／mL］高于肿瘤未转移患者［8．03（6．59～10．25）pg／mL］，差异有统计学意义（P＜0．05），提示TNF－α在肿瘤浸润及转移过程中表达增高。2．4TNF－α联合CEA、CA724在3组受试者中的表达水平差异TNF－α联合CEA、CA724在结直肠癌组患者中的表达比结直肠良性疾病组及健康对照组明显增高，差异有统计学意义（P＜0．05），3项血清标志物在结直肠良性疾病组和健康对照组的表达无明显差异。2．5TNF－α、CEA、CA724联合检测作为结直肠癌的血清标志物的准确度及ROC曲线TNF－α、CEA、CA724作为结直肠癌血清标志物的准确度评价见表5，ROC曲线见图1（见《国际检验医学杂志》网站主页“论文附件”）。TNF－α、CEA、CA724、TNF－α＋CEA＋CA724作为结直肠癌血清标志物的ROC曲线下面积分别为0．868（95％CI：0．791～0．944）、0．912（95％CI：0．863～0．962）、0．523（95％CI：0．412～0．635）、0．940（95％CI：0．889～0．992）。

3讨论

结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤，发病率位居恶性肿瘤第3位，肿瘤的侵袭和转移是导致患者预后差及死亡的主要原因，其发病过程有多个因素影响。有研究发现肿瘤微环境是由肿瘤细胞、间质细胞（如炎性细胞、成纤维细胞等）、趋化因子及细胞因子等共同构成［5－7］。炎性细胞是肿瘤微环境中间质的重要组成部分，可分泌多种炎性细胞因子（TNF－α、IL－1、IL－6），其中TNF－α主要由肿瘤相关巨噬细胞分泌，可以启动慢性炎症。研究表明，慢性炎症在恶性肿瘤的发生和进展过程中发挥着重要作用，不仅可以促进肿瘤细胞的生长、侵袭、转移和血管生成，还为肿瘤的发生和进展提供适宜的肿瘤微环境［8－9］。

本研究结果显示，TNF－α在结直肠癌组、结直肠良性疾病组和健康对照组的含量中位数结果分别为8．76、6．45、6．05pg／mL，表明结直肠癌组的TNF－α明显高于结直肠良性疾病组和健康对照组，说明TNF－α对结直肠癌的诊断有一定意义，TNF－α很可能在结肠癌发生、发展过程中起了促进作用。研究表明TNF－α通过激活核转录因子κB（NF－κB）和活化蛋白1（AP－1）两种炎性信号通路关键因子，通过这2条信号途径来促进细胞的增殖和逃逸，从而促进肿瘤的定植［10－12］。TNF－α还可以通过稳定肿瘤上皮间质转化的相关转录因子Snail，促进肿瘤的转移［13－14］。本研究结果还发现，TNF－α作为结直肠癌血清标志物，对判断肠癌是否发生转移具有重要意义。TNF－α在肠癌转移患者中的表达比肠癌未转移患者明显增高，而在临床TNM分期上，Ⅰ期患者TNF－α表达水平最低，有肿瘤细胞淋巴转移及远端转移的Ⅲ、Ⅳ期表达水平较高，这对判断肠癌及其预后具有重要意义。生理学研究结果显示TNF－α具有促进肿瘤生长的作用，其内源性自分泌的TNF－α可诱导成纤维细胞分泌蛋白酶，破坏间皮表层导致肿瘤发生浸润，调控中性粒细胞的基因表达而促进肿瘤浸润和转移［15］。

ROC曲线显示，CEA诊断结直肠癌最佳判断界值为2．17ng／mL（AUC＝0．912，95％CI：0．863～0．962，灵敏度89．53％，特异度82．50％），而TNF－α最佳判断界值为7．54pg／mL（AUC＝0．868，95％CI：0．791～0．944，灵敏度72．22％，特异度92．31％），ROC曲线下面积CEA（0．912）高于TNF－α（0．868），但CEA作为非特异性肿瘤标志物，仅有40％～70％结直肠癌患者的血清CEA升高，有研究表明部分结直肠癌患者血液CEA检测结果呈阴性，而部分良性结肠病患者CEA则轻度升高［16］；CA724作为胃肠道肿瘤和卵巢癌的标志物，在本研究结果显示，其灵敏度为34．78％，特异度为98．73％，诊断结直肠癌的ROC曲线下面积，单独使用TNF－α（0．868）高于单独使用CA724（0．523）；TNF－α、CEA、CA724联合诊断ROC曲线下面积为0．940，证明3项血清标志物联合诊断能够有效提高诊断效能。TNF－α作为结直肠癌的血清标志物，对其早期诊断和转移及预后具有重要意义，后续将扩大样本量进行深入研究。

参考文献

［1］金多晨，曹海龙，董文逍，等．肠道微生态失衡与结肠炎相关肠癌发生发展的研究进展［J］．肿瘤药学，2016，6（5）：321－325.

［2］崔曼莉，张明鑫，张超，等．肿瘤相关性炎症与结肠癌［J］．世界华人消化杂志，2016（32）：4343－4353．

［3］郭宝文，何宁，翟东良．白细胞介素－6和肿瘤坏死因子－α与大肠癌预后的关系［J］．中国现代医学杂志，2015，25（4）：41－43．

［4］赵鹏，陈俊卯，曹文斌，等．TNF－α在结肠癌细胞侵袭和迁移中的作用探讨［J］．天津医药，2015，43（12）：1368－1372.

［6］崔云龙．肿瘤相关巨噬细胞在结直肠癌中的研究进展［J］．中国肿瘤临床，2012，39（24）：2121－2124．

［7］杨敏，杜杰，WellsA．巨噬细胞的免疫重塑：防治肿瘤转移的新靶点［J］．中国药理学与毒理学杂志，2016，30（10）：1065－1066.

［11］濮勇，陈锁成．核转录因子－κB在结肠癌中的表达及临床意义［J］．江苏大学学报（医学版），2012，22（4）：350－353．

［12］刘宝玉，黄杰安，刘诗权，等．NF－κB对人结肠癌细胞上皮间质转化及侵袭转移的影响［J］．世界华人消化杂志，2014（23）：3403－3409.

［14］代剑波，王继见，郝亚琴．探讨Snail调控上皮间质转化在结直肠癌侵袭、转移方面的作用及意义［J］．重庆医科大学学报，2011，36（6）：645－649.

作者：龙华婧；夏阳；刘道利；曾亭亭；邱芳华 单位：广州市中医医院检验科