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肾移植癌螺旋CT

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VX2肿瘤是由shope病毒诱发的兔可移植性肿瘤,可接种到不同器官而成兔移植瘤模型[1]。它具有生长速度快、血供丰富、较早出现坏死和转移等特点,是应用广泛的大动物肿瘤模型。我们对兔VX2肝癌模型的传代方式进行了一些改进,并采用螺旋CT扫描技术检测瘤灶并评价肿瘤生长情况。

1材料与方法

1.1材料

日本大白兔30只,体重2.5kg~3.0kg,雌雄不限,由西安交通大学动物实验中心提供,VX2肿瘤兔由第四军医大学提供。PQ-6000超高档螺旋CT,18G穿刺活检切割针。造影剂用欧乃派克。

1.2方法

待荷瘤兔肿瘤形成直径约2cm大小时完整切取,在冰块上去除包膜及坏死组织,剪取肿瘤边缘生长旺盛部分置于Hanks液中。尽量剪碎约1mm,制成瘤细胞悬液[2]。接种兔麻醉状态下CT引导18G穿刺针进入右肾下级,注入瘤细胞悬液0.3ml。手术操作于1.5h内完成。实验动物肌肉注射青霉素40万U,连续3d。肿瘤移植后第7天、第9天、第11天、第13天、第15天、第17天、第19天、第21天、第23天、第25天、第27天,实验动物在耳缘静脉麻醉后行螺旋CT平扫及增强扫描。增强CT造影剂选用欧乃派克,剂量5ml,经耳缘静脉以0.5ml/s速度注射[3]。扫描条件:电压为120kV,电流为200mA,螺距1.25,层距5mm,层厚5mm。观察肾脏及肾内肿瘤的大小、形态特点,用所测数据计算肿瘤体积和肿瘤生长率(TGF=a2b2~a1b1/a1b1×100%)。观察肾门及腹主动脉旁淋巴结变化,是否出现癌栓及液化坏死等。于每次CT扫描后即刻活杀一只兔,切取原发瘤灶及可疑淋巴结、肝脏、肺脏转移组织进行光学显微镜检查。

2结果

2.1肿瘤成瘤率

本组30例全部成瘤。术后螺旋CT平扫,肾下极瘤灶及穿刺道未见明显出血征象。观察期间荷瘤兔生长正常,未见感染及其他并发症。植瘤后2周~3周,肿瘤体积增长稳定,边缘完整,形态规则,密度均匀,无远处转移,是进行实验研究的最佳时段。

2.2肿瘤螺旋CT表现

肿瘤种植灶在1周左右时较小,CT难以显示或仅显示点状低密度灶,强化不明显。2周时瘤灶直径达1cm~2cm,平扫呈低密度或等密度,边界清楚,密度较均匀,周围未见水肿形成(见图1)。强扫描呈明显强化,其中环形强化18例,环形壁厚,较均匀,未见明显壁结节形成,中间可见未强化区,未见明确肿瘤血管(见图2)。较均匀强化12例;3周瘤灶明显增大,直径在3cm~5cm之间,螺旋CT平扫可见密度不均匀,17例出现坏死,且坏死明显,中间可见囊变区呈水样密度;增强扫描呈不规则环形强化,强化与2周时扫描比减低,环形壁较薄,无壁结节形成;9例可见肾内多个大小不一的结节状转移灶,增强特点与主病灶相似,病变为低密度,与周围增强肾脏组织形成明显对比。4例有肾门及肾主动脉旁淋巴结转移。

2.3荷瘤兔存活及病检

荷瘤兔自然存活时间为接种后6周~7周,其中3例存活50d。荷瘤兔死亡前表现明显恶病质,体重下降,拒食,活动减少,呼吸困难。活检可见肿瘤体积巨大,周围广泛浸润、粘连,肾内、腹壁、腹膜后可见多个大小不一转移结节;肾门、主动脉旁、肝门部、大网膜、肠系膜可见多个肿大淋巴结,部分融合;15例可见肝脏多发转移,脾脏未见转移灶。24例有双肺弥漫粟粒样转移灶,14例有血性胸腔积液,有大叶性肺实变表现2例。肿瘤大体呈灰白色,质硬,切面呈鱼肉样,有包膜,巨大肿块切开可见有果酱样液体流出,有空洞形成,壁不规则,瘤体中央因缺血坏死而成豆渣样。镜下表现为鳞癌。

3讨论

以往肾癌模型大多建立在裸鼠移植癌,该方法操作复杂,成瘤率低。VX2肿瘤是由Shop病毒在兔皮肤诱发的鳞癌经数十次传代而建立。兔肾VX2肿瘤模型,传代简易、方便、生物学性质稳定,性质明确。该肿瘤虽不是肾脏原发性肿瘤,但具有转移瘤的一切特点,肿瘤虽是来源于皮肤的鳞癌,但肿瘤血供丰富,生长速度快,易出现坏死[4],表现与人类原发性肾癌类似,是临床研究肝脏肿瘤的理想模型。国内外有较多报道,有细胞悬液经皮穿刺直接种植法,剖腹直视下瘤组织块直接种植法等,采用肿瘤细胞或悬液直接种植成功率可达100%,但较费时、费力。采用腿部皮下接种成瘤并传代作为瘤种进行肾脏接种虽然成功率不及前者,但较简单、经济,成功率高。我们采用在螺旋CT透视下穿刺活检的方法进行肿瘤的活体传代。在肾脏种植肿瘤时进针较深,将组织块用导丝推至肾内,随后用少量明胶海绵以同样的方法封堵针道,拔针后并压迫片刻。一方面减少瘤块逆出致腹腔种植,另一方面尽量使肿瘤种植在肾脏下极深部。其定位准确,成功率较高,本组成功率为100%。操作简单,动物创伤小,并发症少,本组无一例动物因感染或出血死亡。

螺旋CT扫描检测兔VX2肾癌病灶显示清晰,对瘤灶的变化可进行动态观测,避免了实验动物必须开腹或处死才能观测瘤灶。我们经过反复摸索得出电压:120kV,电流:200mA,螺距:1.25,层距:5mm,层厚:5mm的扫描条件。在CT平扫上瘤灶呈低密度,少数为等密度,当有坏死时为明显低密度;增强扫描瘤灶呈明显强化;与人肾癌CT表现相似。在肿瘤的种植时间上以2周~3周左右的瘤灶显示清晰,表现典型。1周左右的瘤灶常较小,难以观测到。而3周以上的瘤灶大多出现明显的坏死且远处出现多发转移灶。CT表现的低密度区,与尸检发现肿瘤液化坏死是吻合的。表明肿瘤生长迅速,恶性程度高。实验中我们还观测到通过动物多次传代的肿瘤会增加免疫原性[5],较早出现坏死且坏死明显,所以应尽量避免反复种植传代。

肾移植癌螺旋CT责任编辑:刘老师    阅读:人次