电针对尿潴留后家兔膀胱内压的影响范文

本文作者：程莉莉吴聪英睢明河单位：北京中医药大学针灸推拿学院

急性尿潴留（acuteurinaryretention，AUR）是泌尿外科中下尿路梗阻常见的并发症，易造成膀胱功能严重受损，膀胱功能延迟恢复，有的甚至无法恢复［1－2］。目前临床上多采用引流尿液的方法被动等待膀胱功能的恢复，这种治疗方法缺乏减轻膀胱损害、促使膀胱功能恢复的措施。同时，在AUR过程中，会引起膀胱内压的改变［3］及膀胱组织三磷酸腺苷（adenosinetriphosphate，ATP）含量的变化［4］。有研究显示［5］，正常人的排尿过程既受大脑皮质高级排尿中枢和脊髓初级排尿中枢的控制，也受周围神经的支配，其中副交感神经在排尿过程中起主要作用，当其兴奋时可使逼尿肌收缩、内括约肌松弛，引起排尿。武晓红等［6］认为，针刺主要通过影响与排尿相关的外周、中枢神经的活动以及神经递质的释放来达到调控膀胱机能的作用。①外周神经机制：穴位传入神经元与膀胱传入神经元相重叠，针刺的作用主要通过影响支配膀胱、尿道的外周传入或传出神经活动进而影响骶髓排尿中枢和脊髓上中枢来发挥调节作用。②中枢神经机制：膀胱的初级排尿中枢在骶髓，高级排尿中枢为脑干和大脑。从大脑、脑干到骶髓的各级排尿中枢均参与了针刺－膀胱效应的形成，但针效主要依赖脊髓上中枢产生。③神经递质：针刺还可以通过调节神经传导通路中相关递质的合成和释放来影响膀胱的活动。按照“合治内府”理论，膀胱的下合穴委中应该是治疗膀胱疾病的首选穴位。但多年来，在国家统编教材《针灸学》《针灸治疗学》中，治疗这些疾病的主穴在远端是三阴交，甚至在配穴中委中也几乎没有被提到。另外阴陵泉是利尿的要穴，也是治疗膀胱疾病的重要穴位。本实验意在观察委中、三阴交、阴陵泉治疗膀胱疾病的异同，通过观察电针“委中”“三阴交”“阴陵泉”穴对AUR模型家兔膀胱内压和膀胱组织ATP含量的影响，探讨针刺治疗膀胱疾病的优势穴位，同时也为“合治内府”理论提供实验依据。

1材料与方法

1．1实验动物与分组健康清洁级成年雄性家兔48只，体质量（2．0±0．2）kg，由北京市海淀区兴隆实验动物养殖厂提供，动物合格证号为：SCXK（京）2011－0006。饲料为北京市海淀区兴隆实验动物养殖厂提供的富含多种成分的配方。实验过程中对动物的处理遵循中华人民共和国科技部2006年颁布的《关于善待实验动物的指导性意见》［7］。所有动物均按相同的饲养条件喂食，自由饮水，适应性饲养1周后进行实验。室温为20～22℃，相对湿度为60％。将动物随机分为正常组、模型组、委中组、三阴交组、阴陵泉组和非经非穴组，每组8只。

1．2主要试剂与仪器BL－420＋型生物机能信号采集系统（成都泰盟科技有限公司）；YP100型压力换能器（北京新航兴业科贸有限公司）；BT223S型电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；5415R高速离心机（德国Eppendorf公司）；玻璃匀浆器和酶联免疫分析检测试剂盒（北京环亚泰克生物医学技术有限公司）；BCD－539WH型超低温冰箱（中国海尔公司）；韩氏LH202H型电针治疗仪（北京华卫产业开发公司）；华佗牌一次性针灸针（0．25mm×13mm，苏州华佗医疗器械有限公司）。

1．3模型制备参照Chien等［8］所建立的膀胱过度充盈模型进行。将家兔用20％乌拉坦（5mL／kg）耳缘静脉麻醉，仰卧位固定于兔台上，10号导尿管由尿道插入膀胱（6～7cm），用4号丝线环绕尿道结扎，导净尿液，再以5mL／min的速度灌注37℃温生理盐水充盈膀胱，灌注量达到测定膀胱容量的2倍，保持2h后模型形成。造模后的膀胱内压较造模前降低50％以上，表示造模成功。膀胱容量的测定：实验前家兔禁食水12h。基本操作同前，导尿管的另一端接1个三通管，其一端连接标有刻度的生理盐水瓶，另一端接压力换能器（压力换能器连接BL－420＋型生物机能信号采集系统来观察和记录膀胱内压的变化）。当生理盐水灌注至采集系统的显示器上膀胱内压达到并保持一定的相对平稳状态后（此时的膀胱内压一般在13～17cmH2O），又有了明显的上升趋势时的临界点的灌注量即为家兔的正常膀胱容量。其测得的正常家兔膀胱容量为17～23mL。

1．4取穴及电针方法“委中”：膝关节屈面正中凹陷处；“三阴交”：内踝尖直上3cm；“阴陵泉”：膝关节下内侧，胫骨内侧髁直下方凹陷处；非经非穴：腓骨小头后下方，因为它既不属于任一条经，也不是任一穴位，并且位于下肢，作为对照穴，有可比性。所有穴位均为双侧取穴。各电针组在AUR模型建立后，排空尿液即刻电针相应穴位，针刺深度为5mm，针柄接韩氏电针治疗仪，疏密波频率为2Hz／15Hz，电流强度0．6mA左右，以针柄轻微抖动为宜，留针20min。

1．5指标检测的时间、方法膀胱内压的检测：正常组只测量1次；模型组分别于造模前（即灌注2倍膀胱容量时即刻）、造模后（即灌注2倍膀胱容量2h后还未排尿时）以及与电针组电针前后的相同时间点测量；电针组分别于造模前、后及电针前（即灌注2倍膀胱容量2h排尿后）、后测量。将导尿管通过三通塑料管与压力换能器相连，再与BL－420＋型生物机能信号采集系统相连，测量膀胱内压。膀胱组织ATP检测：各组膀胱内压检测完成后，用耳缘静脉注射空气处死家兔，下腹部正中开腹取出膀胱组织，放于冰块上，用生理盐水冲洗干净，放置电子天平上称重。再放入玻璃匀浆管中，用移液枪按15％～25％的比例加入生理盐水，进行匀浆，然后离心（4℃，15min，3500r／min）。收集离心好的上清液放置于－20℃冰箱中保存备用。最后用酶联免疫分析法检测，具体操作按照试剂盒说明书进行。

1．6统计学处理实验数据采用SPSS17．0统计软件分析，各组数据均用均数±标准差（x珚±s）表示。各组内比较采用两组配对t检验，各组间比较采用单因素方差分析，继以LSD／SNK两两比较，以P＜0．05为差异有统计学意义。

2结果

2．1电针对家兔膀胱内压的影响如图1所示，与造模前比较，造模后各组的膀胱内压显著降低（P＜0．01），且造模后的膀胱内压较造模前均降50％以上，提示造模成功。与正常组比较，电针前其它5组的膀胱内压明显降低（P＜0．05）；与电针前比较，电针后各电针组的膀胱内压明显升高（P＜0．05）；与同时段模型组比较，电针后各电针组的膀胱内压较高（P＜0．05）。如图2所示，与模型组比较，电针后各电针组的膀胱内压升高率明显偏高（P＜0．05）；与非经非穴组比较，电针后其它电针组的膀胱内压升高率明显较高（P＜0．05）；委中、三阴交及阴陵泉组之间膀胱内压升高率的差异无统计学意义（P＞0．05）。

2．2电针对家兔膀胱组织ATP的影响如图3所示，模型组与正常组比较膀胱ATP含量明显降低（P＜0．05）；与模型组比较，电针后委中、三阴交和阴陵泉组的膀胱ATP含量明显＜0．05）；与非经非穴组比较，电针后委中、三阴交及阴陵泉组的膀胱ATP含量明显升高（P＜0．05）；且委中组与三阴交和阴陵泉组比较膀胱ATP含量的差异有统计学意义（P＜0．05）；三阴交组和阴陵泉组之间的ATP含量差异无统计学意义（P＞0．05）。

3讨论

三阴交穴是足三阴经的交会穴，针刺该穴不仅能调畅脾经的经气运行，健脾除湿、运化水湿，而且还能调理肝经和肾经的经气运行，使肝气疏泄功能正常发挥，促进水液代谢，使肾主水脏、主津液的功能恢复正常，从而达到三脉并调，恢复膀胱气化功能［9］。阴陵泉穴为足太阴脾经的合（水）穴，针刺该穴有健脾渗湿、通经活络、通利小便的功用。委中是膀胱的下合穴，按照“合治内府”理论和古代医籍的图3各组家兔膀胱组织ATP含量的比较（x珚±s，8只兔／组）Fig3Comparisonofadenosinetriphosphate（ATP）contentsintheurinarybladdertissueamongrabbitsofthenormal，model，EA－BL40，EA－SP6，EA－SP9andEA－NAgroups（x珚±s，8rabbits／group）＊P＜0．05，与正常组比较（vsthenormalgroup）；△P＜0．05，与模型组比较（vsthemodelgroup）；＃P＜0．05，与非经非穴组比较（vstheEA－NAgroup）；▲P＜0．05，与委中组比较（vstheEA－BL40group）．大量记载，委中是治疗膀胱疾病的首选穴位。膀胱内压可以反映膀胱张力、节律性收缩等，与膀胱功能状况有密切关系。尿潴留后，膀胱壁肌肉由于长时间被牵拉，膀胱张力减弱，故膀胱内压降低。叶笑然等［10］的研究说明膀胱内压波动的频谱分析是反映针刺调控膀胱机能的有价值的客观量化指标。ATP是嘌呤能神经的递质，通过与其受体结合参与多种功能调节。李为兵［11］在研究ATP及其受体P2X参与膀胱感觉中描述前人的研究：膀胱充盈过程中其上皮细胞可释放ATP，作用于上皮下感觉神经纤维上的P2X受体（主要是P2X2、P2X3），参与膀胱的容量感觉、痛觉和排尿反射形成。膀胱组织ATP含量可较早反映膀胱组织损害情况，由于正常膀胱组织主要由逼尿肌层构成，因此它的变化能较好反映膀胱逼尿肌损害情况，且膀胱组织ATP含量在膀胱充盈2h排空后1h内显著下降［4］。排尿是一项复杂的生理活动，受多级神经的控制。从现代医学角度看，针刺可从中枢和外周神经两个方面调节膀胱的机能，即针刺影响脑桥排尿中枢的兴奋水平，进而调节膀胱功能［12］；针刺影响脊髓排尿中枢，并通过盆神经和阴部神经引起逼尿肌的收缩和尿道外括约肌开放［13］。膀胱逼尿肌、内外括约肌受植物神经、阴部神经的共同支配，排尿和贮尿任何一方发生障碍均可出现排尿异常［14］。针灸对神经具有双重调节作用，它既可兴奋神经，也可抑制神经，从而使紧张性膀胱肌得到缓解，膀胱压力下降，使松弛性膀胱肌得以兴奋，促使膀胱肌收缩，从而有效地降低尿潴留的发生［15］。临床实践证实电针治疗尿潴留可有效地改善膀胱逼尿肌功能，缓解尿道外括约肌痉挛［16］，从而使患者逐步达到自主排尿的功能状态。本实验结果提示，电针“委中”“三阴交”及“阴陵泉”穴能提高AUR后膀胱的内压，使其向正常的方向发展，说明电针此三穴都能治疗尿潴留等相关疾病；电针“委中”“三阴交”及“阴陵泉”穴都能提高AUR后膀胱组织ATP的含量，而电针非经非穴对膀胱组织ATP含量无明显的改善作用。在升高膀胱组织ATP含量方面，“委中”效果最好，提示“委中”穴是治疗尿潴留等膀胱疾病的最佳穴位。